ପଲିଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ପାଇଁ ସତର୍କତା

· ପଲିଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ଜେଲ୍ ମାଷ୍ଟ୍ ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ମୋନୋମର, ପଲିମରାଇଜେସନ୍ ଆରମ୍ଭ ସାମଗ୍ରୀ, ଉତ୍ପ୍ରକାଶକ, ଏବଂ ଲୁଣ ଏବଂ ବଫର ମିଶ୍ରଣର ଡାହାଣକୁ ଏକାଠି କରି।

· ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ଏବଂ BIS (N, N '- ମିଥାଇଲିନ୍ ଡବଲ୍ ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍) ହେଉଛି ମୋନୋମର ଫର୍ମ ଜେଲ୍ ମାଟ୍ରିକ୍ସ।

· ଆମୋନିୟମ୍ ପର୍ସଲଫେଟ୍ ଆଡେସିଭ୍ ପଲିମରାଇଜେସନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଆରମ୍ଭ କରେ। ଆଲୁଅ ଗଠନ ପାଇଁ ପାଣିରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ 10% ଆମୋନିୟମ୍ ପର୍ସଲଫେଟ୍ ଦ୍ରବଣ ଆବଶ୍ୟକ। ଅଧିକାଂଶ ସୂଚନା ସକ୍ରିୟ ବ୍ୟବହାରର ଆବଶ୍ୟକତା ସୂଚାଇଛି। ତଥାପି, 10% ଦ୍ରବଣକୁ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କ୍ଷତି ବିନା କିଛି ସପ୍ତାହ ପାଇଁ 4℃ ରେ ରଖାଯାଇପାରିବ। 10 ମିଲି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ତିଆରି କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଆଲୁଅ ଏକାଠି ନ ହେଲେ ପରିତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ।

ଟିପ୍: ଏହାର ଶତକଡ଼ାଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍କ୍ରମୀକରଣରେ ଗ୍ଲୁ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଗ୍ଲୁ ସମାନ ନୁହେଁ। ଯଦି ପୂର୍ବରୁ ତିଆରି ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍: BIS ଦ୍ରବଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଛନ୍ତି, ତେବେ ସଠିକ୍ ବୋତଲ ପାଇବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ।

· TEMED (N, N, N ', N ' - ଟେଟ୍ରାମିଥାଇଲ ଇଥିଲେନିଆମିନ୍) ହେଉଛି ଏକ ଉତ୍ପ୍ରକାଶକ, ଏକ ବାଦାମୀ ବୋତଲରେ, ରେଫ୍ରିଜରେଟରରେ ରଖାଯାଏ। ଗ୍ଲୁ ଢାଳିବା ପୂର୍ବରୁ ଯୋଡନ୍ତୁ।

· ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍‌ରେ ବ୍ୟବହୃତ ପଲିଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍‌ କାଚକୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର ପୂର୍ବରୁ ଏବଂ ପରେ ଧୋଇବା ଉଚିତ। ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍‌ ପରେ, ଗରମ ସାବୁନ ପାଣିରେ ଏକ ନରମ ବ୍ରଶ୍ ଏବଂ କପଡ଼ା ସାହାଯ୍ୟରେ ଧୋଇ, ଡିଷ୍ଟିଲ୍ ପାଣିରେ ଧୋଇ ଶୁଖିବା ପାଇଁ ରଖନ୍ତୁ।

· ଫମ୍ପା ପଲିମର ସହିତ ଆର୍ଦ୍ରତା ଏବଂ ଧୂଳି ସୃଷ୍ଟି ହୋଇପାରେ। ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ପୂର୍ବରୁ, କାଚ କ୍ଲିନର୍ ସହିତ କାଚ ପ୍ଲେଟ୍ ସଫା କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଏକ ନରମ ବ୍ରଶ୍ ସହିତ ପୋଛି ଦିଅନ୍ତୁ। ଡିଷ୍ଟିଲେଡ୍ ପାଣିରେ ଧୋଇ ପେପର୍ ୱାଇପ୍ ସହିତ ଭଲ ଭାବରେ ଶୁଖନ୍ତୁ। କାଗଜ ସହିତ ପୋଛିବା ପୂର୍ବରୁ 70% ଇଥାନଲ୍ ସହିତ ଧୋଇବା ଦ୍ଵାରା ସଫା ହେବା ଏବଂ ଶୁଖିବା ଦ୍ରୁତ ହେବାରେ ସାହାଯ୍ୟ ହୁଏ। କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ର ନମୁନା ଯୋଡନ୍ତୁ: BIS, ପାଣି, ବଫର ଦ୍ରବଣ, ଆମୋନିୟମ୍ ପର୍ସଲଫେଟ୍, TEMED। ଭଲ ଭାବରେ ହଲାନ୍ତୁ ଏବଂ ତୁରନ୍ତ ଢାଳି ଦିଅନ୍ତୁ।

ପଲିମରାଇଜେସନ୍ ପୂର୍ବରୁ ପଲିଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଡିଗାସ୍ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ ନୁହେଁ। (ଅକ୍ସିଜେନ୍ ପଲିମରାଇଜେସନ୍ ବାଧା ଦେଉଥିବାରୁ ବବୁଲ୍ସ ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଏକ ଶୂନ୍ୟ ସ୍ଥାନରେ ରଖାଯାଉଥିଲା।)

ଭୂସମାନ୍ତର ଗ୍ଲୁ ପଏଣ୍ଟ ନମୁନା ଟିପ୍ସ।

· ଅଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବରେ ଦେଖିବା ପାଇଁ କିଛି ନମୁନା ଗାତ କରିବା ପାଇଁ ତଳ ବାକ୍ସରେ କଳା କାଗଜର ଏକ ଖଣ୍ଡ ରଖନ୍ତୁ, କଳା ପୃଷ୍ଠଭୂମି।
· କଲଏଡ୍ ଉପରେ ଗ୍ଲୁ ଟାଙ୍କି ଭର୍ତ୍ତି ବଫର।
· ଯଦି ଧାରରେ ଆଲୋକ ଅଛି, ତେବେ ଆଲୋକ ଜଳାଅ, ଆଲୋକ କୋଲଏଡ୍ ଚମକୁ ଦିଅ। ନମୁନାକୁ ପାଇପେଟ୍‌ରେ ଟାଣ।
· ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ପାଇପେଟିଂ ଡିଭାଇସ୍ ବ୍ୟବହାର କରି।
· ନମୁନାର ଅଧିକାଂଶ ବିନ୍ଦୁରେ 10-200 mu ରେ 1 ତରଳ ଗତି ବିନ୍ଦୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ। ବହୁତ ଛୋଟ ନମୁନା ଗାତ ପାଇଁ (10μ1 ରୁ କମ୍), ଗ୍ଲୁ କ୍ରମ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ଲମ୍ବା ପାଇପେଟ୍ ମୁଣ୍ଡ ଅଧିକ ସୁବିଧାଜନକ।

· ନମୁନାରେ ବୁଡ଼ାଇ ଦିଆଯାଇଥିବା ପାଇପେଟିଂ, ଧୀରେ ଧୀରେ ଗତିଶୀଳ ତରଳ ପଦାର୍ଥକୁ ନିଶ୍ୱାସ ନେବା। ନମୁନାଟି ଗ୍ଲିସେରିନ୍ ସହିତ ଚିପିଚିପି ଦେଖାଯାଇପାରେ, ଏବଂ ଦ୍ରୁତ ପମ୍ପିଂ ପିପେଟ୍ ମୁଣ୍ଡକୁ ବାୟୁ ବୁଦବୁଦ ଟାଣିପାରେ।

· ନମୁନାଗୁଡ଼ିକ ପାଇପେଟିଂ ମୁଣ୍ଡକୁ ନିଶ୍ୱାସ ନେବା ପରେ, ପାଇପର ଧାରରେ ତରଳ ମୁଣ୍ଡକୁ ଧୀରେ ଘୁଞ୍ଚାଇବେ କିମ୍ବା କାଗଜ ପୋଛି ତରଳ ମୁଣ୍ଡକୁ ବୁନ୍ଦା ବାହାରେ ଘୁଞ୍ଚାଇବେ। ନମୁନାକୁ ଶୋଷି ନଦେବା ପାଇଁ ସତର୍କ ରୁହନ୍ତୁ।

ନମୁନାକୁ ନମୁନା ଗାତରେ ରଖନ୍ତୁ।

· ଟିକିଏ ଚାପ ରଖିବା ପାଇଁ ପାଇପେଟିଂ ଡିଭାଇସ୍, ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ଓଭରଫ୍ଲୋ ତରଳ ମୁଣ୍ଡକୁ ସାମାନ୍ୟ ଘୁଞ୍ଚାଇବାକୁ ବାଧ୍ୟ କରେ।
· ବଫରରେ ସନ୍ନିବେଶିତ ପାଇପେଟିଂ ହେଡ୍, ସ୍ପଟ୍ ହୋଲ୍ ଠାରୁ ଟିକିଏ ଉଚ୍ଚ, ସକାରାତ୍ମକ ଚାପ ବଜାୟ ରଖେ। ପାଇପେଟର ଅଗ୍ରଭାଗକୁ ଏକ ଛୋଟ ଗାତରେ ସନ୍ନିବେଶ କରାଯାଇପାରିବ।
· ଧୀରେ ଧୀରେ ଏବଂ ସ୍ଥିର ଭାବରେ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକୁ ବାହାର କରନ୍ତୁ। ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ ବିନ୍ଦୁ ନମୁନା ଗାତ ଉପରେ ରଖାଯାଏ, ଏବଂ ନମୁନା ଗାତ ଭିତରେ ବୁଡ଼ିଯିବ। ନମୁନାକୁ ଭିତରକୁ ଠେଲି ଦେବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ନମୁନା ଗାତକୁ ପୂରଣ କରିବା ପାଇଁ ବୁଡ଼ିବାକୁ ଦିଅନ୍ତୁ।
· ତରଳ ମୁଣ୍ଡ ସହିତ ନମୁନାର ଶେଷ ବୁନ୍ଦା ପଡ଼ିବା ପରେ, ତରଳ ଦ୍ୱିତୀୟ ଗୋଡକୁ ଚାଲିଯିବ, ଧୀରେ ଧୀରେ ତରଳ ଗତିକୁ ଉଠାଇବ, ବଫରରୁ ବାହାରକୁ ଚାଲିଯିବ।

ଭୂଲମ୍ବ ଗ୍ଲୁ ନମୁନା କିପରି କରିବେ?

· ଦୁଇଟି କାଚ ଖଣ୍ଡ ମଧ୍ୟରେ ଗଠିତ ଭୂଲମ୍ବ ଗ୍ଲୁ ପଏଣ୍ଟ ନମୁନା ଗାତ। ଅତି ପତଳା ଗ୍ଲୁରେ, ପିପେଟ୍ ମୁଣ୍ଡ ଦୁଇଟି କାଚ ପ୍ଲେଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ମଧ୍ୟ ଭର୍ତି କରାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ। ଗ୍ଲିସେରିନ୍ ଉପରେ ନଜର ରଖନ୍ତୁ! ନମୁନା ଗାତ ଉପରେ ପିପେଟ୍ ମୁଣ୍ଡ ରଖନ୍ତୁ ଏବଂ ନମୁନା ଗାତ ଭିତରେ ବୁଡ଼ିଯିବ।
· ପୂର୍ବରୁ ନମୁନା ପଏଣ୍ଟ କରନ୍ତୁ, ପଲିପ୍ରୋପିଲିନ୍ ଆସିଲ୍ ଜେଲ୍ ନମୁନା ଗାତର ଉଲମ୍ବ ବିନ୍ଦୁକୁ ଧୋଇ ସଫା କରିବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ। ପଲିମରାଇଜ୍ଡ ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍ ଏବଂ ନମୁନା ଗାତର ତଳ ଭାଗରେ ଦେଖାଯାଉଥିବା ପାଣିକୁ ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ। ପାଣି ନମୁନା ଗାତକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ଛୋଟ କରିପାରେ। ଏକ 25ml କିମ୍ବା 50ml ସିରିଞ୍ଜ ଏବଂ ଏକ 18-ଗେଜ୍ ଛୁଞ୍ଚି ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ। ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବଫରରେ ଢାଳନ୍ତୁ ଏବଂ ସାବଧାନତାର ସହିତ ନମୁନା ଗାତକୁ ଫ୍ଲସ୍ କରନ୍ତୁ।
· ନମୁନା ଗାତ ଦେଖିବା କଷ୍ଟକର ହୋଇପାରେ, କିନ୍ତୁ ସମାନ ଭାବରେ, ବାକି ସବୁ ସହଜ। ଯଦି ଅଧିକ ଗାତ ଥାଏ, ତେବେ ନମୁନା ବଫରକୁ ବ୍ରୋମୋଫେନୋଲ୍ ନୀଳ ସହିତ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇପାରିବ।